2018年8月20日，上海海關(guān)蔣原副關(guān)長帶領(lǐng)的微生物團(tuán)隊研發(fā)的空腸彎曲菌實時熒光PCR快速檢測方法獲得AOAC PTM認(rèn)證，這是我國微生物領(lǐng)域首個自主研發(fā)的通過AOAC國際認(rèn)證的微生物快速檢測方法。

 

　　AOAC（美國官方分析化學(xué)家協(xié)會，Association of Official Analytical Chemists）于1884年成立于美國，現(xiàn)已成為一個倍受國際矚目的、致力于食品和農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的微生物和化學(xué)分析方法驗證和認(rèn)可的國際組織。AOAC已被國際認(rèn)可為金標(biāo)準(zhǔn)的頒布者和驗證者，提供世界范圍內(nèi)可信賴的分析檢測方法。經(jīng)過AOAC認(rèn)證的檢測方法在國際上具有非常高的可信度和權(quán)威性。AOAC認(rèn)證一般分為兩步：第一步為PTM（性能測試方法，Performance Tested Method）認(rèn)證，依據(jù)AOAC方法驗證規(guī)范嚴(yán)格進(jìn)行方法開發(fā)者實驗室驗證和獨立實驗室驗證，經(jīng)同行評審專家審核通過后給予AOAC授權(quán)的認(rèn)可編號；第二步為OMA（官方分析方法，Official Methods of Analysis）申請，在PTM認(rèn)證通過的基礎(chǔ)上，通過協(xié)同實驗室驗證并專家評審?fù)ㄟ^后，將其升級為AOAC國際標(biāo)準(zhǔn)。

 

　　國外一些知名公司研制的食源性致病菌檢測方法已陸續(xù)獲得AOAC PTM認(rèn)證。如生物梅里埃公司生產(chǎn)的基于生化免疫方法的各類致病菌VIDAS檢測試劑盒、基于質(zhì)譜的Vitek MS細(xì)菌鑒定方法；Thermo Fisher Scientific公司、Pall GeneDisc Technologies 公司、Qiagen公司、杜邦公司、伯樂公司等生產(chǎn)的PCR相關(guān)的各類食源性致病菌快速檢測試劑盒；3M公司生產(chǎn)的各類食源性致病菌檢測紙片、BD公司生產(chǎn)的各類食源性致病菌顯色培養(yǎng)基；Merck KgaA / EMD Chemicals公司生產(chǎn)的基于免疫色譜技術(shù)的各類致病菌快速檢測試劑盒等。雖然通過AOAC PTM認(rèn)證的致病菌檢測試劑盒結(jié)果準(zhǔn)確可靠，但價格不菲，且多數(shù)快速檢測試劑盒只能在其指定的儀器上使用，不利于降低我國食品微生物檢測成本。

 

　　上海海關(guān)（原上海出入境檢驗檢疫局）蔣原副關(guān)長帶領(lǐng)的微生物團(tuán)隊長年致力于食源性致病菌的快速檢測、致病機(jī)理、分型溯源等研究。該團(tuán)隊在彎曲菌研究領(lǐng)域國內(nèi)領(lǐng)先。彎曲菌在世界范圍內(nèi)是引起人類細(xì)菌性腸胃炎的一個最主要致病因素。空腸彎曲菌是食品中最常見的彎曲菌種，人彎曲菌感染90%以上是由空腸彎曲菌引起。傳統(tǒng)的基于生化的空腸彎曲菌檢測方法操作繁瑣、準(zhǔn)確度不高。實時熒光PCR方法是基于基因的方法，比傳統(tǒng)的生化方法更準(zhǔn)確、快速。該團(tuán)隊自主研發(fā)的空腸彎曲菌實時熒光PCR試劑盒從開始研發(fā)到獲得AOAC認(rèn)證歷時三年，團(tuán)隊成員精益求精，高標(biāo)準(zhǔn)高要求多次優(yōu)化試劑盒，最終成功研制出可與進(jìn)口大品牌試劑盒媲美的具有自主知識產(chǎn)權(quán)的試劑盒。該試劑盒特異性強(qiáng)、靈敏度高、穩(wěn)健性好、批間重復(fù)性好、質(zhì)量穩(wěn)定可靠、含有內(nèi)部擴(kuò)增對照可防止“假陰性”、 開放性好、可在各大主流品牌實時熒光PCR儀上使用。經(jīng)過嚴(yán)格的方法開發(fā)者驗證和獨立實驗室驗證以及兩輪專家審核，2018年8月20日，AOAC三位審核專家一致同意給予該試劑盒AOAC performance testedsm認(rèn)證，認(rèn)證編號081804。

 

　　該團(tuán)隊主持及參與多項國家級及省部級的項目，發(fā)表多篇相關(guān)高質(zhì)量論文，制定多項國標(biāo)和檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，獲得多項省部級獎。在國內(nèi)外首次發(fā)現(xiàn)了空腸彎曲菌24 種新ST 型、副溶血性弧菌6 個新血清型和34個新ST 型，填補了全球空腸彎曲菌和副溶血性弧菌相關(guān)基因型和血清型的空白；在國內(nèi)外首次建立了空腸彎曲菌感染GBS 的巴馬小型豬動物模型，確定了空腸彎曲菌誘發(fā)GBS病發(fā)早期的檢測指標(biāo)，挖掘出GBS 致病相關(guān)的11 個關(guān)鍵基因，為空腸彎曲菌致GBS的機(jī)理研究指明方向。制定了國標(biāo)《GB/T 4789.9-2008 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 空腸彎曲桿菌檢驗》和多項檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《SN/T 0175-2010 進(jìn)出口食品中彎曲桿菌的檢測方法》、《SN/T 3639-2013 出口食品中空腸彎曲桿菌的檢測方法 實時熒光PCR法》、《SN/T 2754.7-2011 出口食品中致病菌環(huán)介導(dǎo)恒溫擴(kuò)增（LAMP）檢測方法 第7部分：空腸彎曲桿菌》、《SN/T 3728-2013 進(jìn)出口食品中空腸彎曲桿菌快速檢測方法 量子點免疫熒光法》、《出口食品中空腸彎曲菌藥物敏感性的測定 微量稀釋法》出口食品致病致病菌的分子分型MLST方法系列行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，并在質(zhì)監(jiān)部門、企業(yè)、檢測機(jī)構(gòu)、科研院等得到廣泛應(yīng)用，保障了我國進(jìn)出口食品的質(zhì)量安全。項目成果被納入中國工程院食品安全咨詢戰(zhàn)略規(guī)劃“中國食品安全現(xiàn)狀、問題和對策戰(zhàn)略研究”。

 

　　本次AOAC PTM認(rèn)證為該團(tuán)隊及國內(nèi)其它試劑盒生產(chǎn)商提供了可借鑒的經(jīng)驗，該團(tuán)隊將再接再厲，即將進(jìn)行副溶血性弧菌等致病菌實時熒光PCR試劑盒的AOAC PTM認(rèn)證。我國自主研發(fā)的食源性致病菌檢測試劑盒的研制和國際認(rèn)證將有助于提升我國國產(chǎn)試劑盒的整體質(zhì)量和在國際上的認(rèn)可度，降低我國微生物快速檢測的成本，提高通關(guān)速度，促進(jìn)我國進(jìn)出口食品貿(mào)易；同時也填補了我國微生物先進(jìn)檢測技術(shù)AOAC國際認(rèn)證的空白，為下一步AOAC國際標(biāo)準(zhǔn)的研制積累經(jīng)驗，有助于增強(qiáng)我國在世界科學(xué)領(lǐng)域的話語權(quán)。