近日，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院質(zhì)量安全所安全控制功能材料與智能化創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)在SCI期刊Analytical Biochemistry上發(fā)表了Cry2Aa殺蟲蛋白抗獨(dú)特型抗體創(chuàng)制的最新研究進(jìn)展。團(tuán)隊(duì)成員林曼曼為論文第一作者，劉賢金研究員、劉媛副研究員和Johnson Lin教授（University of KwaZulu-Natal）為論文共同通訊作者。

 

　　Bt Cry毒素廣泛用于轉(zhuǎn)基因抗蟲作物構(gòu)建及微生物源農(nóng)藥開發(fā)，然而，Cry毒素存在毒力有限、殺蟲譜窄等系列問題，目前仍有許多害蟲不能被Cry毒素有效控制，另外，長(zhǎng)時(shí)間大范圍的使用導(dǎo)致昆蟲的抗性風(fēng)險(xiǎn)不斷上升，因此挖掘新的抗蟲基因資源尤為重要。本研究借助噬菌體展示技術(shù)和體外定向突變技術(shù)，以前期獲得的抗獨(dú)特型單鏈抗體為研究對(duì)象，分別擴(kuò)增該抗體重、輕鏈基因，并采用SOE-PCR技術(shù)拼接獲得完整的單鏈抗體（scFv），構(gòu)建了隨機(jī)突變庫，經(jīng)過多輪特異性富集篩選，成功獲得一株與Cry2Aa兔多抗結(jié)合活性提高2.2倍的突變體，并對(duì)Cry2Aa與多抗的結(jié)合具有競(jìng)爭(zhēng)抑制作用。該突變株與Cry2Aa殺蟲蛋白靶標(biāo)害蟲小菜蛾（Plutella xylostella） BBMV受體蛋白具有顯著結(jié)合能力，并與Cry2Aa在小菜蛾BBMV受體蛋白有共同的結(jié)合蛋白脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（polycalin）。該材料為進(jìn)一步深入探索挖掘Cry2Aa殺蟲蛋白模擬物提供了研究基礎(chǔ)。

 

　　該研究得到國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目、國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目和江蘇省自主創(chuàng)新等項(xiàng)目資助。

 

　　文章鏈接：Anti-idiotypic single-chain variable fragment antibody partially mimic the functionally spatial structure of Cry2Aa toxin, Analytical Biochemistry, 625 （2021）， https://doi.org/10.1016/j.ab.2021.114222。