近日，中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所邱麗華研究員創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦E3泛素連接酶TRIM50-like在抗白斑綜合征病毒先天免疫中的作用及其分子機(jī)制方面的研究取得新進(jìn)展，相關(guān)研究成果以“Identification of a Shrimp E3 Ubiquitin Ligase TRIM50-Like Involved in Restricting White Spot Syndrome Virus Proliferation by Its Mediated Autophagy and Ubiquitination”為題，發(fā)表在Frontiers in Immunology（Impact Factor 5.085）上，趙超為第一作者，邱麗華為通訊作者。該研究成果是邱麗華研究員創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)在“對(duì)蝦等海洋無(wú)脊椎動(dòng)物先天免疫”領(lǐng)域系列研究之一，獲得國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（2018YFD0900103）和國(guó)家自然科學(xué)基金（42006113））等項(xiàng)目資助。

 

　　隨著對(duì)蝦養(yǎng)殖集約化程度的提高，病害問(wèn)題日益凸顯，其中對(duì)蝦白斑綜合征病毒（WSSV）已成為全球?qū)ξr養(yǎng)殖業(yè)所面臨的危害性最大的病毒之一。TRIM家族蛋白的抗病毒作用在高等動(dòng)物中已被充分論證，但在以對(duì)蝦為代表的水產(chǎn)無(wú)脊椎動(dòng)物中卻鮮有報(bào)道。邱麗華創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)通過(guò)研究，從斑節(jié)對(duì)蝦克隆并鑒定了一種TRIM50-like基因，并將其命名為PmTRIM50-like。通過(guò)qRT-PCR和Western blotting檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，PmTRIM50-like對(duì)蝦在腸道和胃組織中的相對(duì)表達(dá)量較高；受到WSSV刺激后，PmTRIM50-like蛋白及其mRNA在腸道和血細(xì)胞中顯著上調(diào)表達(dá)，表明PmTRIM50-like可能參與WSSV感染過(guò)程；當(dāng)PmTRIM50-like的表達(dá)被干擾后，對(duì)蝦體內(nèi)的VP28在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的表達(dá)量明顯增加，WSSV病毒的拷貝數(shù)顯著增加，對(duì)蝦的存活率顯著下降。過(guò)表達(dá)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)過(guò)表達(dá)對(duì)蝦體內(nèi)的PmTRIM50-like mRNA后，對(duì)蝦體內(nèi)的VP28在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的表達(dá)量明顯減少，WSSV病毒的拷貝數(shù)也顯著降低。這說(shuō)明PmTRIM50-like在斑節(jié)對(duì)蝦體內(nèi)參與抑制WSSV的復(fù)制。Western blotting、透射電鏡和免疫細(xì)胞熒光化學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明，WSSV或細(xì)胞自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素刺激能誘導(dǎo)對(duì)蝦細(xì)胞自噬的發(fā)生；而細(xì)胞自噬在對(duì)蝦內(nèi)被證明起抑制WSSV復(fù)制的作用。當(dāng)干擾PmTRIM50-like的表達(dá)后，結(jié)果顯示W(wǎng)SSV或劑雷帕霉素誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬作用被明顯抑制。這說(shuō)明斑節(jié)對(duì)蝦PmTRIM50-like參與正向調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬的發(fā)生。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，干擾PmTRIM50-like的表達(dá)后，雷帕霉素誘導(dǎo)的對(duì)蝦細(xì)胞自噬被抑制，從而失去抑制WSSV復(fù)制的作用。這說(shuō)明PmTRIM50-like可能通過(guò)正向調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬來(lái)參與抑制WSSV病毒的復(fù)制。最后，通過(guò)Pull-down和體外泛素化實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步證明了PmTRIM50-like可以識(shí)別并泛素化WSSV的囊膜蛋白VP24、VP26和VP28。綜合以上結(jié)果，該研究表明PmTRIM50-like可能通過(guò)自身介導(dǎo)的細(xì)胞自噬和泛素化來(lái)參與抑制WSSV的復(fù)制。

 

　　全文鏈接https://doi.org/10.3389/fimmu.2021.682562。