近日,園藝學院果樹逆境生物學團隊徐凌飛教授課題組在Plant Physiology在線發(fā)表了題為“Transcription factor PbNAC71 regulates xylem and vessel development to control plant height”的研究論文。該研究揭示了‘PbRNF217-PbNAC71-PbWAT1’模型通過影響木質(zhì)部、導管發(fā)育調(diào)控梨株高的分子機制,博士研究生叢柳為本論文第一作者,徐凌飛教授為論文通訊作者。
矮化栽培具有早果、豐產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、便于機械化操作等優(yōu)點,是現(xiàn)代果樹生產(chǎn)發(fā)展的方向。優(yōu)良矮化砧木是實現(xiàn)梨矮化栽培的基礎和關鍵。目前,由于缺乏理想的梨矮化砧木,國內(nèi)梨生產(chǎn)栽培仍然沿用喬化密植栽培。因此,挖掘梨優(yōu)良致矮基因,解析調(diào)控機制,為梨矮化砧木和矮生品種的分子育種提供理論依據(jù)和基因資源,對于加快梨矮化栽培具有重要意義。
課題組首先在矮化砧穂組合中篩選到一個可能調(diào)控梨株高的NAC家族轉(zhuǎn)錄因子PbNAC71。通過轉(zhuǎn)基因功能驗證,證明了PbNAC71是一個調(diào)控梨生長發(fā)育的負調(diào)控因子。與野生型相比,轉(zhuǎn)基因‘OHF-333’梨和煙草木質(zhì)部及導管顯著減小,株高降低,表現(xiàn)出明顯的矮生表型。同時,篩選出了PbNAC71調(diào)控木質(zhì)部、導管發(fā)育的下游基因PbWAT1,并驗證了其功能。分子互作實驗證明了PbNAC71能通過結(jié)合PbWAT1啟動子上的SNBE元件降低其啟動子活性。
進一步研究發(fā)現(xiàn)PbNAC71蛋白能與E3泛素連接酶PbRNF217蛋白互作,并通過體內(nèi)/體外蛋白降解實驗證明了PbRNF217能促進PbNAC71發(fā)生依賴26S蛋白酶體的泛素化降解。本研究在過表達PbNAC71的轉(zhuǎn)基因煙草中又過表達了PbRNF217。與單轉(zhuǎn)基因煙草相比,雙轉(zhuǎn)基因煙草株高顯著增加,NtWAT1的表達顯著上調(diào),木質(zhì)部及導管大小也明顯增加大。并且我們還發(fā)現(xiàn)MG132處理后,雙轉(zhuǎn)基因煙草生長受到顯著抑制,NtWAT1顯著下調(diào)表達,其木質(zhì)部及導管大小也顯著減小。這些結(jié)果表明PbRNF217能促進PbNAC71發(fā)生依賴26S蛋白酶體的泛素化降解,調(diào)控木質(zhì)部及導管發(fā)育,從而影響植株高度。
綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)并解析了梨矮生基因PbNAC71調(diào)控木質(zhì)部及導管發(fā)育導致矮生的分子機制,形成了‘PbRNF217-PbNAC71-PbWAT1’的調(diào)控模型,為選育梨矮生品種和矮化砧木提供了重要的理論依據(jù)和參考。
西北農(nóng)林科技大學園藝學院博士研究生叢柳為本論文第一作者,徐凌飛教授為論文通訊作者,馬鋒旺教授等參與了該研究。該研究得到了國家重點研發(fā)計劃項目支持。研究還得到了園藝學院園藝科學研究中心在實驗技術上的支持。
文章鏈接:https://doi.org/10.1093/plphys/kiae011