近日,華中農(nóng)業(yè)大學(xué)稻曲病研究團隊聯(lián)合安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)在Nature Communications上在線發(fā)表了題為“A secreted fungal laccase targets the receptor kinaseOsSRF3 to inhibit OsBAK1–OsSRF3-mediated immunity in rice”的研究論文。該論文首次解析了真菌分泌性漆酶的致病機理,鑒定到一個水稻免疫相關(guān)類受體激酶OsSRF3,對研究植物先天免疫機制和創(chuàng)制新的水稻廣譜抗病材料具有重要價值。
稻曲病是世界水稻生產(chǎn)中的主要病害之一,不僅造成稻米產(chǎn)量損失,且稻曲球中產(chǎn)生的毒素對動物細胞具有毒性和致畸作用,嚴重威脅糧食安全。在我國,稻曲病發(fā)生尤為嚴重,年均發(fā)生面積4500萬畝、減產(chǎn)超1.5億公斤。培育抗稻曲病品種被認為是目前最經(jīng)濟有效的防治措施,但現(xiàn)階段抗稻曲病品種和抗性基因資源嚴重缺乏,很難鑒定到優(yōu)異的主效抗性位點。因此,如何高效挖掘和鑒定稻曲病優(yōu)異的抗病蛋白是未來稻曲病持久綠色防控的關(guān)鍵瓶頸問題。
植物與病原菌互作過程中,植物本身進化出一套有效的先天免疫系統(tǒng)來抵御病原菌的侵染,主要包括PTI和ETI兩個免疫層次。病原菌侵染植物后,植物細胞表面模式識別受體通過識別PAMP來激活第一層PTI反應(yīng);而成功突破第一層PTI免疫屏障的病原菌則通過分泌毒性效應(yīng)蛋白造成植物感病,即ETS。為應(yīng)對病原菌這一策略,植物會利用抗病(R)蛋白來特異性識別效應(yīng)蛋白,從而觸發(fā)第二層ETI反應(yīng)。ETI與PTI反應(yīng)的理論框架構(gòu)成了經(jīng)典認知的Zig-zag模型。用稻曲菌效應(yīng)蛋白挖掘與之對應(yīng)的水稻免疫相關(guān)蛋白,根據(jù)其抗病機制服務(wù)作物抗性設(shè)計改良;這是當(dāng)前培育優(yōu)良抗稻曲病品種的重要途徑之一。
本研究發(fā)現(xiàn)稻綠核菌素合成酶UgsL是稻曲病菌致病關(guān)鍵效應(yīng)子,具有典型的漆酶活性,基因敲除后突變體致病力完全喪失。異源表達UgsL可以抑制水稻引起的免疫反應(yīng),而靶向UgsL進行寄主誘導(dǎo)的基因沉默則增強水稻的抗病能力。通過篩選和互作驗證發(fā)現(xiàn)UgsL與水稻類受體激酶OsSRF3在細胞膜上互作,OsSRF3基因編輯和過表達不會影響水稻的農(nóng)藝性狀,但正調(diào)控水稻對稻曲病、稻瘟病、紋枯病和白葉枯病的廣譜抗病性。一系列體內(nèi)、體外生化試驗證明UgsL可通過泛素化-26S蛋白酶體促進OsSRF3降解,并且UgsL漆酶活性影響OsSRF3穩(wěn)定性。油菜素類固醇受體相關(guān)激酶OsBAK1與OsSRF3相互作用,體外實驗發(fā)現(xiàn)OsBAK1可以直接磷酸化OsSRF3,體內(nèi)實驗證明Ser670位點的磷酸化促進了OsSRF3的穩(wěn)定性和植株抗病性。進一步實驗發(fā)現(xiàn)UgsL能夠與OsBAK1競爭性結(jié)合OsSRF3,導(dǎo)致OsBAK1對OsSRF3的磷酸化修飾水平降低,進而影響OsSRF3穩(wěn)定性,從而抑制OsBAK1–OsSRF3介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。
綜上所述,在稻曲菌侵染過程中,水稻質(zhì)膜上的OsBAK1-OsSRF3復(fù)合物識別稻曲菌分泌的PAMPs后,OsBAK1磷酸化OsSRF3去激活MAPK信號和ROS爆發(fā),誘導(dǎo)防御相關(guān)基因的表達,從而增強水稻免疫反應(yīng)。作為致病策略,稻曲菌分泌具有漆酶活性的效應(yīng)子UgsL與OsSRF3相互作用,并通過泛素化-26S蛋白酶體促進其降解,從而抑制OsBAK1–OsSRF3介導(dǎo)的免疫途徑。
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院博士生段宇航、安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)王招云副教授為論文共同第一作者。安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)陳曉洋教授、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)鄭露副教授為論文共同通訊作者;華中農(nóng)業(yè)大學(xué)黃俊斌教授、羅朝喜教授、陳小林教授、劉浩副教授、畢業(yè)碩士裴張新、博士生胡虹、廣西大學(xué)徐秋濤教授、安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)博士生方圓也參與了該項研究。