一、主要變化

 

　　1.刪除了術(shù)語和定義；

 

　　2.增加了檢驗原理；

 

　　3.修改了設(shè)備和材料、培養(yǎng)基和試劑；

 

　　4.修改了檢驗程序、操作步驟和附錄。

 

　　二、詳細(xì)內(nèi)容比對

 

　　1

 

　　修改了標(biāo)準(zhǔn)的范圍描述

　　征求意見稿中第一法、第二法的適用范圍分開描述，處理過程明確、清晰。

 

　　a、增加44.5 ℃±0.2 ℃恒溫裝置，對于冰箱的設(shè)備參數(shù)進(jìn)行微調(diào)。

 

　　b、增加了易耗品無菌試管、接種環(huán)、吸管及均質(zhì)袋和均質(zhì)杯的材料要求。

 

　　c、刪除了菌落計數(shù)器、紫外燈等設(shè)備的要求。

 

　　a、刪除了蛋白胨水、緩沖葡萄糖蛋白胨水[甲基紅（MR）和 V-P 試驗用]、西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)（EMB）瓊脂、營養(yǎng)瓊脂斜面、結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）、結(jié)晶紫中性紅膽鹽-4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷瓊脂（VRBA-MUG）、 革蘭氏染色液、Kovacs 靛基質(zhì)試劑等培養(yǎng)基。

 

　　b、由于現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn) ISO 16649-2:2001及ISO 16649-3：2015 均采用 TBX 瓊脂對食品、動物飼料中大腸埃希氏菌進(jìn)行平板計數(shù)。將樣品稀釋液接種于多管選擇性肉湯中，對于發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸者，劃線接種于 TBX 瓊脂平板，有藍(lán)色或藍(lán)綠色 菌落判斷為陽性，因此征求意見稿中也用 胰蛋白胨膽鹽 X-葡萄糖醛酸苷（Tryptone Bile X-glucuronide，TBX）瓊脂進(jìn)行確認(rèn)實驗。

 

 

　　a、征求意見稿檢驗程序中刪除了12版中的伊紅美藍(lán)平板分離培養(yǎng)、營養(yǎng)瓊脂斜面或平板培養(yǎng)、然后進(jìn)行靛基質(zhì)試驗、MR-VP 試驗和檸檬酸鹽利用試驗的過程，直接用TBX 瓊脂平板進(jìn)行驗證實驗，流程更簡潔。

 

　　b、檢驗程序“接種EC肉湯”后的培養(yǎng)時間由原來的“48h±2h”修改為“24~48h”。

 

　　1）樣品稀釋

 

　　a、稀釋液增加“生理鹽水”，讓操作者有更多的選擇。

 

　　b、樣品稀釋過程中刪除了換用1mL無菌吸管反復(fù)吹打的操作文字描述。

 

　　c、修改并增加了液態(tài)樣品制備的操作部分，更詳細(xì)。

　　2）初發(fā)酵、復(fù)發(fā)酵試驗過程變化不大，進(jìn)行細(xì)微的調(diào)整。

 

　　3）確認(rèn)實驗直接用TBX瓊脂進(jìn)行，減少了繁瑣的生化鑒定過程，實驗操作更方便、快捷。

 

　　a、征求意見稿中也是進(jìn)行了培養(yǎng)基的調(diào)整，描述也進(jìn)行了相應(yīng)的調(diào)整。

　　b、征求意見稿中新增了大腸埃希氏菌菌落數(shù)的計算。

 

　　結(jié)果報告在2012版的基礎(chǔ)上進(jìn)行了細(xì)化，菌落生長大于和小于100的情況分別給出了相關(guān)要求描述。

 

　　a、征求意見稿中 附錄 A 培養(yǎng)基和試劑也是進(jìn)行了相應(yīng)的調(diào)整，并增加了附錄C 貝類產(chǎn)品中大腸埃希氏菌最可能數(shù)（MPN）檢索表 。

    相關(guān)報道：食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)審評委員會秘書處關(guān)于征求《食品中亞硝酸鹽限量》等38項食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)（征求意見稿）意見的函（食標(biāo)秘發(fā)〔2023〕2號）