中國農業(yè)科學(xué)院植物保護研究所糧食作物真菌病害監測與防控創(chuàng )新團隊聯(lián)合深圳農業(yè)基因組所研究發(fā)現水稻ANIP1-OsWRKY62分子模塊，并探索了該模塊參與水稻基礎免疫反應以及抗病蛋白Pi9信號通路的工作機制。研究成果“The ANIP1-OsWRKY62 module regulates both basal defense and Pi9-mediated immunity against Magnaporthe oryzae in rice”在線(xiàn)發(fā)表在Molecular Plant雜志。

 

　　稻瘟病是全世界范圍內威脅水稻穩產(chǎn)增產(chǎn)的最主要病害之一。綠色防控稻瘟病需要深入挖掘抗病基因資源，合理布局與利用抗病基因，了解稻瘟菌的侵染機理以及解析抗病基因的抗性機制。目前在水稻中已經(jīng)克隆了超過(guò)30個(gè)抗稻瘟病基因，其中Pi9是2006年被報道的具有廣譜持久抗性的抗病基因。更重要的是，由于Pi9在兼具抗性的同時(shí)對水稻產(chǎn)量沒(méi)有明顯的影響，使其成為抗病育種中的優(yōu)良基因資源。稻瘟菌的AvrPi9是Pi9對應的無(wú)毒基因，二者相互識別激活免疫反應。AvrPi9編碼一個(gè)效應蛋白，在侵染過(guò)程中分泌到水稻細胞中。然而，AvrPi9的工作機制以及如何被Pi9識別仍然不清楚。

 

　　該研究首先篩選到AvrPi9在水稻中的一個(gè)互作蛋白，稱(chēng)為ANIP1 （AVRPI9-INTERACTING PROTEIN 1）。ANIP1是一個(gè)含有類(lèi)泛素（ubquitin-like，UBL）結構域的蛋白，其同源蛋白廣泛存在于單子葉和雙子葉植物中。研究人員進(jìn)而通過(guò)對ANIP1的敲除和過(guò)表達株系的接種表型鑒定以及轉錄組分析發(fā)現ANIP1是基礎防御的負調控因子。并且，ANIP1蛋白本身可以通過(guò)結合OsRPN10、OsRPN13等泛素受體介導自身的降解。為了進(jìn)一步探索ANIP1的生理功能，篩選并鑒定到ANIP1在水稻中的互作蛋白OsWRKY62。OsWRKY62蛋白在anip1突變體中更為穩定，并且在煙草系統中ANIP1能夠促進(jìn)OsWRKY62的降解，因此，ANIP1負調控OsWRKY62蛋白穩定性。在無(wú)Pi9的水稻背景中，OsWRKY62是稻瘟菌抗性的正調控因子，而AvrPi9可以通過(guò)維持ANIP1的穩定性促進(jìn)其對OsWRKY62的降解，以達到減弱寄主免疫反應的目的。然而，當Pi9存在時(shí)，整個(gè)系統發(fā)生巨大變化：Pi9同樣可以穩定ANIP1，但此時(shí)ANIP1和OsWRKY62均可以結合Pi9。在Pi9背景下敲除ANIP1或OsWRKY62能夠顯著(zhù)增強水稻對親和稻瘟病菌小種的抗性，推測ANIP1和OsWRKY62結合Pi9可能參與維持Pi9在無(wú)病原菌侵染情況下的非激活狀態(tài)。最后，研究發(fā)現AvrPi9可以促進(jìn)ANIP1和Pi9的解離并釋放Pi9，這可能是AvrPi9激活Pi9的重要步驟之一。

 

　　該研究在水稻中發(fā)現了一個(gè)由ANIP1-OsWRKY62組成的分子調節模塊，闡明了稻瘟病菌與水稻互作系統中，在有無(wú)AvrPi9/Pi9的情形下精細調控植物免疫反應的作用機理，為深入了解AvrPi9與Pi9的識別機制奠定了重要基礎。

 

　　圖1 ANIP1-OsWRKY62參與AvrPi9與Pi9信號通路模型

 

　　論文鏈接：https://www.cell.com/molecular-plant/fulltext/S1674-2052（23）00065-5