為了更可靠地獲得靶基因的相對表達水平,團隊評估了10個候選參考基因的穩(wěn)定性,分析在不同實驗條件下參考基因的最佳數(shù)量,以及用免疫相關(guān)基因EsPrx4驗證篩選參考基因的重要性。
結(jié)果表明,在鰻弧菌的刺激下,AK和EF-1α是最合適的參考基因。在銅離子的刺激下,GAPDH和β-ACTIN是最合適的參考基因。
該研究工作得到了中央公益性科研機構(gòu)基礎(chǔ)研究基金項目 (2020TD36), 江蘇省重點農(nóng)業(yè)新品種選育項目(PZCZ201749)、江蘇重點研發(fā)計劃項目(BE2022360)、江蘇種業(yè)振興項目(JBGS(2021)031)、泰州市農(nóng)業(yè)種業(yè)研究項目(TZZYYF02)的支持。相關(guān)成果論文“Screening of Suitable Reference Genes for Immune Gene expression Analysis Stimulated by Vibrio anguillarum and Copper Ions in Chinese Mitten Crab (Eriocheir sinensis)”發(fā)表于國際期刊《genes》(JCR二區(qū),IF=3.5)上。